• 1.瀘州醫學院附屬醫院血管外科(四川瀘州 646000);;
  • 2.復旦大學遺傳工程國家重點實驗室(上海 200433);;
  • 3.上海第二醫科大學附屬第九人民醫院血管外科(上海 200011);
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目的  在大腸桿菌高效表達人血管內皮生長因子蛋白質。
方法  用PCR從人胎兒腦cDNA文庫擴增血管內皮細胞生長因子(VEGF)cDNA,得到517bp的DNA片段。擴增片段重組到M13mP18中,經測序證實為VEGF165cDNA。將該片段重組到PRL621溫控表達質粒中,在大腸桿菌表達20kd的重組蛋白。
結果  該表達產物占菌體總蛋白的35%,其N-端15個氨基酸序列與天然VEGF165蛋白相應序列一致。
結論  工程菌TG1/PRL621/VEGF高效表達人VEGF165蛋白質。

引用本文: 何延政,劉建平,謝毅,張培華. 人血管內皮細胞生長因子cDNA克隆和在大腸桿菌的高效表達. 中國普外基礎與臨床雜志, 2001, 8(2): 72-74. doi: 復制