體外培養人膽囊上皮細胞的形態學及培養條件的優化_《中國普外基礎與臨床雜志》

作者：

李勝富 ¹ , 潘光棟 ² , 劉瑾 ¹ , 熊先澤 ² , 劉江文 ² , 張杰 ³ , 步宏 ³ , 程南生 ²

1.四川大學華西醫院衛生部移植工程和移植免疫重點實驗室（成都610041）;;
2.四川大學華西醫院肝膽胰外科;;
3.四川大學華西醫院病理科;

關鍵詞：

人膽囊上皮細胞培養形態學

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目的探索人膽囊上皮細胞的最佳分離方法和適宜的體外生長條件，為深入研究膽囊的生理功能和相關疾病的病理機理奠定基礎。方法用Ⅳ型膠原酶消化及鈍性刮離法分離膽囊上皮細胞，兩步貼壁法純化。比較層粘連蛋白、多聚賴氨酸、纖維連接蛋白等不同培養基質對傳代細胞生長的影響。光鏡及電鏡下觀察細胞的形態和超微結構。結果每個膽囊可分離得到（1～5）×107個膽囊上皮細胞，細胞活性可達90%。細胞呈典型的扁平多角狀、柱狀形態，片狀貼壁生長，上皮細胞特異性抗原CK19表達陽性。結論Ⅳ型膠原酶消化法加鈍性刮剝分離法和兩步貼壁法可成功分離高活性、高純度的人膽囊上皮細胞；纖維連接蛋白包被的培養器皿和含20%小牛血清及10 ng/ml hEGF的DMEM培養基有利于膽囊上皮細胞的體外培養。

引用本文： 李勝富,潘光棟,劉瑾,熊先澤,劉江文,張杰,步宏,程南生. 體外培養人膽囊上皮細胞的形態學及培養條件的優化. 中國普外基礎與臨床雜志, 2003, 10(5): 459-462. doi: 復制

1.	Oda D, Lee SP, Hayashi A. Longterm culture and partial characterization of dog gallbladder epithelial cells [Ｊ]. Lab Invest， 1991; 64(5)∶682.
2.	Luciano L, Reale E. Brush cells of the mouse gallbladder. A correlative light and electronmicroscopical study [Ｊ]. Cell Tissue Res，1990; 262(2)∶339.
3.	O’Brien JA, James PS, Torre M. Primary cultures of guineapig gallbladder epithelial cells suitable for patchclamp studies [Ｊ]. Exp Physiol， 1991; 76(5)∶807.
4.	Plevris JN, Walker SW, Harrison DJ, et al. Primary culture of bovine gall bladder epithelial cells [Ｊ]. Gut， 1993; 34(11)∶1612.
5.	Kozuka S, Tsubone N, Yasui A, et al. Relation of adenoma to carcinoma in the gallbladder [Ｊ]. Cancer， 1982; 50(10)∶2226.
6.	張兆祥, 尹為華, 朱忠堯，等. 膽囊腺瘤和腺瘤癌變 [Ｊ]. 中華外科雜志， 1994; 32(4)∶400.

1. Oda D, Lee SP, Hayashi A. Longterm culture and partial characterization of dog gallbladder epithelial cells [Ｊ]. Lab Invest， 1991; 64(5)∶682.
2. Luciano L, Reale E. Brush cells of the mouse gallbladder. A correlative light and electronmicroscopical study [Ｊ]. Cell Tissue Res，1990; 262(2)∶339.
3. O’Brien JA, James PS, Torre M. Primary cultures of guineapig gallbladder epithelial cells suitable for patchclamp studies [Ｊ]. Exp Physiol， 1991; 76(5)∶807.
4. Plevris JN, Walker SW, Harrison DJ, et al. Primary culture of bovine gall bladder epithelial cells [Ｊ]. Gut， 1993; 34(11)∶1612.
5. Kozuka S, Tsubone N, Yasui A, et al. Relation of adenoma to carcinoma in the gallbladder [Ｊ]. Cancer， 1982; 50(10)∶2226.
6. 張兆祥, 尹為華, 朱忠堯，等. 膽囊腺瘤和腺瘤癌變 [Ｊ]. 中華外科雜志， 1994; 32(4)∶400.

《中國普外基礎與臨床雜志》

體外培養人膽囊上皮細胞的形態學及培養條件的優化

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體外培養人膽囊上皮細胞的形態學及培養條件的優化

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