反義DNMT3b基因真核表達載體轉染對人膽管癌細胞DNMT3b基因表達的影響_《中國普外基礎與臨床雜志》

作者：

左石 , 郭偉 , 劉民鋒 , 董涇青 , 徐立寧 , 羅劍 , 鄒聲泉

華中科技大學同濟醫學院附屬同濟醫院普通外科（武漢430030）;;
通訊作者：鄒聲泉，Email： sqzou@tjh.tjmu.edu.cn;

關鍵詞：

DNA甲基轉移酶3b 反義RNA 轉染基因表達膽管癌

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目的觀察反義DNA甲基轉移酶3b（DNMT3b）基因真核表達載體轉染對人膽管癌QBC-939細胞中DNMT3b基因表達的影響。
方法構建反義DNMT3b基因真核表達載體，通過脂質體轉染到人膽管癌細胞株QBC-939中，G418篩選得到穩定轉染細胞株，PCR鑒定外源性neoR基因在轉染細胞中的表達以確定轉染是否成功。半定量RT-PCR觀察轉染前后DNMT3b基因mRNA水平的變化，流式細胞術檢測轉染前后DNMT3b蛋白的變化。
結果反義DNMT3b基因真核表達載體轉染能使人膽管癌QBC-939細胞中DNMT3b基因的mRNA水平從0.956±0.053降低至0.209±0.023，差異有統計學意義（P＜0.01）；流式細胞術檢測結果顯示，DNMT3b蛋白水平從(75.38±3.22)%降低到(29.87±3.46)%，差異有統計學意義(P＜0.01)。
結論反義DNMT3b基因轉染能降低人膽管癌QBC-939細胞中DNMT3b基因的表達水平，為研究DNMT3b基因功能及其在膽管癌細胞中的作用提供了方法和實驗依據。

引用本文： 左石,郭偉,劉民鋒,董涇青,徐立寧,羅劍,鄒聲泉. 反義DNMT3b基因真核表達載體轉染對人膽管癌細胞DNMT3b基因表達的影響. 中國普外基礎與臨床雜志, 2006, 13(1): 56-60. doi: 復制

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反義DNMT3b基因真核表達載體轉染對人膽管癌細胞DNMT3b基因表達的影響

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