RNAi沉默DLL4基因誘導人乳腺癌細胞凋亡及對多西他賽的增敏作用_《中國普外基礎與臨床雜志》

作者：

王群 ¹ , 余明華 ² , 王耕 ¹ ,  王明華 ¹

1.湖北醫藥學院附屬太和醫院內分泌血管外科（湖北十堰 442000）;;
2湖北醫藥學院基礎醫學研究所（湖北十堰 442000）;

關鍵詞：

RNA干擾乳腺癌 Delta樣配體4 化療敏感性

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目的　探討短發夾RNA（shRNA）靶向沉默DLL4基因對MCF-7細胞凋亡的誘導及對化療藥物多西他賽的增敏作用。
方法　針對DLL4基因的序列設計具有特異性的shRNA，經脂質體轉染MCF-7細胞，作為實驗組，空脂質體轉染的MCF-7細胞為脂質體組，未做任何處理的MCF-7細胞為對照組。采用免疫細胞化學方法檢測3組細胞DLL4蛋白的表達情況；采用流式細胞儀檢測3組細胞凋亡率及細胞周期改變；采用噻唑藍（methyl- thiazoyl-tetrazolium bromide，MTT）法測定3組細胞的增殖情況及對多西他賽的敏感性。
結果　實驗組平均光密度值及陽性面積率均低于對照組和脂質體組（P＜0.01）；實驗組細胞在24h、48h及72h時間點A值均低于對照組和脂質體組（P＜0.01）；轉染后24 h、48 h、72 h及96 h，實驗組細胞凋亡率高于對照組和脂質體組（P＜0.05）；RNA干擾（RNAi）沉默DLL4基因后，實驗組G2/M期細胞比例高于對照組和脂質體組（P＜0.05）；實驗組的IC50值較對照組和脂質體組低（P＜0.05）。
結論　RNAi技術抑制DLL4基因的表達能夠抑制MCF-7細胞的增殖、誘導細胞凋亡及增強細胞對多西他賽作用的敏感性。DLL4可能會成為乳腺癌治療的重要靶點。

引用本文： 王群,余明華,王耕,王明華. RNAi沉默DLL4基因誘導人乳腺癌細胞凋亡及對多西他賽的增敏作用. 中國普外基礎與臨床雜志, 2013, 20(1): 54-59. doi: 復制

1.	Patel NS， Li JL， Generali D， et al. Up-regulation of delta-like 4 ligand in human tumor vasculature and the role of basal expression in endothelial cell function[J]. Cancer Res， 2005， 65(19)：8690-8697.
2.	Benedito R， Trindade A， Hirashima M， et al. Loss of notch signalling induced by Dll4 causes arterial calibre reduction by increasing endothelial cell response to angiogenic stimuli[J]. BMC Dev Biol， 2008， 8(16)：117.
3.	Li JL， Sainson RC， Shi W， et al. Delta-like 4 Notch ligand regulates tumor angiogenesis， improves tumor vascular function， and promotes tumor growth in vivo[J]. Cancer Res， 2007， 67(23)：11244-11253.
4.	Shin S， Sung BJ， Cho YS， et al. An anti-apoptotic protein humansurvivin is a direct inhibitor of caspase-3 and -7[J]. Biochemistry，2001， 40(4)：1117-1123.
5.	魏愛英，張慶柱，張捷. 多西他賽誘導乳腺癌Bcap37細胞凋亡作用的研究[J]. 中華腫瘤防治雜志， 2006， 13(18)：1384-1386.
6.	Siekmann AF， Lawson ND. Notch signalling limits angiogenic cell behaviour in developing zebrafish arteries[J]. Nature， 2007， 445(7129)：781-784.
7.	Scehnet JS， Jiang W， Kumar SR， et al. Inhibition of Dll4-mediated signaling induces proliferation of immature vessels and results in poor tissue perfusion[J]. Blood， 2007， 109(11)：4753-4760.
8.	Hellström M， Phng LK， Hofmann JJ， et al. Dll4 signalling through Notch1 regulates formation of tip cells during angiogenesis[J]. Nature， 2007， 445(7129)：776-780.
9.	Segarra M， Williams CK， Sierra Mde L， et al. Dll4 activation of Notch signaling reduces tumor vascularity and inhibits tumor growth[J]. Blood， 2008， 112(5)：1904-1911.
10.	Dufraine J， Funahashi Y， Kitajewski J. Notch signaling regulates tumor angiogenesis by diverse mechanisms[J]. Oncogene， 2008， 27(38)：5132-5137.
11.	Harrington LS， Sainson RC， Williams CK， et al. Regulation of multiple angiogenic pathways by Dll4 and Notch in humanumbilical vein endothelial cells[J]. Microvasc Res， 2008， 75(2)：144-154.
12.	Zang S， Ji CH，Qu X， et al. A study on Notch signaling in humanbreast cancer[J]. Neoplasma， 2007， 54(4)：304-310.
13.	Jubb AM， Soilleux EJ， Turley H， et al. Expression of vascular notch ligand delta-like 4 and inflammatory markers in breast cancer[J]. Am J Pathol， 2010， 176(4)：2019-2028.
14.	王群，余明華，王耕，等. DLL4和S100A4在不同分子亞型乳腺癌組織中的表達及意義[J]. 中國普外基礎與臨床雜志， 2012， 19(9)：46-50.
15.	王群，余明華，王耕，等. DLL4、COX-2和MMP-2在乳腺癌組織中的表達及臨床意義[J]. 臨床腫瘤學雜志， 2012， 17(9)：814-817.
16.	Indraccolo S， Minuzzo S， Masiero M， et al. Cross-talk between tumor and endothelial cells involving the Notch3-Dll4 interaction marks escape from tumor dormancy[J]. Cancer Res， 2009， 69(4)：1314-1323.
17.	Hoey T， Yen WC， Axelrod F， et al. DLL4 blockade inhibitstumor growth and reduces tumor-initiating cell frequency[J]. Cell Stem Cell， 2009， 5(2)：168-177.
18.	Kajiyama H， Shibata K， Terauchi M， et al. Chemoresistance to paclitaxel induces epithelial-mesenchymal transition and enhances metastatic potential for epithelial ovarian carcinoma cells[J]. Int J Oncol， 2007， 31(2)：277-283.
19.	Shah AN， Summy JM， Zhang J， et al. Development and characterization of gemcitabine-resistant pancreatic tumor cells[J]. Ann Surg Oncol， 2007， 14(12)：3629-3637.
20.	Wang Z， Azmi AS， Ahmad A， et al. TW-37， a small-molecule inhibitor of Bcl-2， inhibits cell growth and induces apoptosis in pancreatic cancer：involvement of Notch-1 signaling pathway[J]. Cancer Res， 2009， 69(7)：2757-2765.
21.	Min C， Eddy SF， Sherr DH， et al. NF-kappaB and epithelial to mesenchymal transition of cancer[J]. J Cell Biochem， 2008， 104(7)：733-744.
22.	Rye PD， Stigbrand T. Interfering with cancer：a brief outline of advances in RNA interference in oncology[J]. Tumour Biol， 2004， 25(5-6)：329-336.
23.	Hannon GJ. RNA interference[J]. Nature， 2002， 418(6894)：244-251.
24.	Brummelkamp TR， Bernards R， Agami R. A system for stable expression of short interfering RNAs in mammalian cells[J]. Science， 2002， 296(5567)：550-553.
25.	劉啟志，王烈. siRNA表達載體對肝素酶基因的沉默作用[J]. 中國普外基礎與臨床雜志， 2010， 17(2)：142-146.

1. Patel NS， Li JL， Generali D， et al. Up-regulation of delta-like 4 ligand in human tumor vasculature and the role of basal expression in endothelial cell function[J]. Cancer Res， 2005， 65(19)：8690-8697.
2. Benedito R， Trindade A， Hirashima M， et al. Loss of notch signalling induced by Dll4 causes arterial calibre reduction by increasing endothelial cell response to angiogenic stimuli[J]. BMC Dev Biol， 2008， 8(16)：117.
3. Li JL， Sainson RC， Shi W， et al. Delta-like 4 Notch ligand regulates tumor angiogenesis， improves tumor vascular function， and promotes tumor growth in vivo[J]. Cancer Res， 2007， 67(23)：11244-11253.
4. Shin S， Sung BJ， Cho YS， et al. An anti-apoptotic protein humansurvivin is a direct inhibitor of caspase-3 and -7[J]. Biochemistry，2001， 40(4)：1117-1123.
5. 魏愛英，張慶柱，張捷. 多西他賽誘導乳腺癌Bcap37細胞凋亡作用的研究[J]. 中華腫瘤防治雜志， 2006， 13(18)：1384-1386.
6. Siekmann AF， Lawson ND. Notch signalling limits angiogenic cell behaviour in developing zebrafish arteries[J]. Nature， 2007， 445(7129)：781-784.
7. Scehnet JS， Jiang W， Kumar SR， et al. Inhibition of Dll4-mediated signaling induces proliferation of immature vessels and results in poor tissue perfusion[J]. Blood， 2007， 109(11)：4753-4760.
8. Hellström M， Phng LK， Hofmann JJ， et al. Dll4 signalling through Notch1 regulates formation of tip cells during angiogenesis[J]. Nature， 2007， 445(7129)：776-780.
9. Segarra M， Williams CK， Sierra Mde L， et al. Dll4 activation of Notch signaling reduces tumor vascularity and inhibits tumor growth[J]. Blood， 2008， 112(5)：1904-1911.
10. Dufraine J， Funahashi Y， Kitajewski J. Notch signaling regulates tumor angiogenesis by diverse mechanisms[J]. Oncogene， 2008， 27(38)：5132-5137.
11. Harrington LS， Sainson RC， Williams CK， et al. Regulation of multiple angiogenic pathways by Dll4 and Notch in humanumbilical vein endothelial cells[J]. Microvasc Res， 2008， 75(2)：144-154.
12. Zang S， Ji CH，Qu X， et al. A study on Notch signaling in humanbreast cancer[J]. Neoplasma， 2007， 54(4)：304-310.
13. Jubb AM， Soilleux EJ， Turley H， et al. Expression of vascular notch ligand delta-like 4 and inflammatory markers in breast cancer[J]. Am J Pathol， 2010， 176(4)：2019-2028.
14. 王群，余明華，王耕，等. DLL4和S100A4在不同分子亞型乳腺癌組織中的表達及意義[J]. 中國普外基礎與臨床雜志， 2012， 19(9)：46-50.
15. 王群，余明華，王耕，等. DLL4、COX-2和MMP-2在乳腺癌組織中的表達及臨床意義[J]. 臨床腫瘤學雜志， 2012， 17(9)：814-817.
16. Indraccolo S， Minuzzo S， Masiero M， et al. Cross-talk between tumor and endothelial cells involving the Notch3-Dll4 interaction marks escape from tumor dormancy[J]. Cancer Res， 2009， 69(4)：1314-1323.
17. Hoey T， Yen WC， Axelrod F， et al. DLL4 blockade inhibitstumor growth and reduces tumor-initiating cell frequency[J]. Cell Stem Cell， 2009， 5(2)：168-177.
18. Kajiyama H， Shibata K， Terauchi M， et al. Chemoresistance to paclitaxel induces epithelial-mesenchymal transition and enhances metastatic potential for epithelial ovarian carcinoma cells[J]. Int J Oncol， 2007， 31(2)：277-283.
19. Shah AN， Summy JM， Zhang J， et al. Development and characterization of gemcitabine-resistant pancreatic tumor cells[J]. Ann Surg Oncol， 2007， 14(12)：3629-3637.
20. Wang Z， Azmi AS， Ahmad A， et al. TW-37， a small-molecule inhibitor of Bcl-2， inhibits cell growth and induces apoptosis in pancreatic cancer：involvement of Notch-1 signaling pathway[J]. Cancer Res， 2009， 69(7)：2757-2765.
21. Min C， Eddy SF， Sherr DH， et al. NF-kappaB and epithelial to mesenchymal transition of cancer[J]. J Cell Biochem， 2008， 104(7)：733-744.
22. Rye PD， Stigbrand T. Interfering with cancer：a brief outline of advances in RNA interference in oncology[J]. Tumour Biol， 2004， 25(5-6)：329-336.
23. Hannon GJ. RNA interference[J]. Nature， 2002， 418(6894)：244-251.
24. Brummelkamp TR， Bernards R， Agami R. A system for stable expression of short interfering RNAs in mammalian cells[J]. Science， 2002， 296(5567)：550-553.
25. 劉啟志，王烈. siRNA表達載體對肝素酶基因的沉默作用[J]. 中國普外基礎與臨床雜志， 2010， 17(2)：142-146.

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