引用本文： 洪育蒲, 郭聞一, 趙亮, 鄧文宏, 項明偉, 余佳, 周瑜, 王衛星. 4-苯基丁酸對重癥急性胰腺炎大鼠肝損傷的保護作用. 中國普外基礎與臨床雜志, 2017, 24(1): 18-23. doi: 10.7507/1007-9424.201605067 復制
重癥急性胰腺炎（severe acute pancreatitis，SAP）是急性胰腺炎的嚴重狀態，伴隨持續的其他器官損傷或功能衰竭。SAP并發肝損傷是常見的胰外臟器損傷之一，但其損傷機理尚未完全明了。肝細胞具有豐富的內質網，當受到有害因素刺激時，未折疊或錯誤折疊的蛋白質在內質網積聚，發生內質網應激（endoplasmic reticulum stress，ERS）[1]，進而激活未折疊蛋白反應（unfolded protein response，UPR鴐。已有研究表明，ERS在急性胰腺炎中發揮了重要作用[2]，并可能參與SAP肝損傷過程[3]。4-苯基丁酸（4-phenylbutyric acid，PBA）是一種小分子脂肪酸，已在臨床上用于治療尿素循環紊亂[4]；同時，它還具有調節ERS，減輕應激損傷的作用[5]。故本研究擬通過建立SAP大鼠模型，觀察PBA對SAP大鼠肝損傷的影響，并初步探討其作用機制。
1 材料與方法
1.1 實驗動物與試劑
成年雄性SPF級SD大鼠24只，購自湖南斯萊克景達實驗動物有限公司，體質量200～220 g，適應性喂養 2～3 d。使用隨機數字表法將實驗大鼠隨機分為假手術組（SO組鴐、SAP組及PBA干預組（PBA組鴐，每組 8 只。PBA和牛磺膽酸鈉（STC）購于Sigma公司，異氟烷購于雅培公司，大鼠葡萄糖調節蛋白78（glucose-regulated protein，GRP78鴐、CCAAT/增強子結合蛋白同源蛋白（CCAAT/ enhancer binding protein homologous protein，CHOP）及Caspase-3抗體均購自Abcam公司，EliVision super檢測試劑盒購自福建邁新生物技術開發有限公司。
1.2 動物模型制備及標本采集
1.2.1 動物模型制備 大鼠術前12 h禁食，自由飲水，稱重。異氟烷氣體麻醉后消毒鋪巾，沿腹正中線切口開腹，尋找十二指腸，暴露胰膽管，經十二指腸大乳頭開口處逆行胰膽管注射5%牛磺膽酸鈉（sodium taurocholate，STC）生理鹽水溶液（1 mL/kg大鼠體質量），以微型無損傷血管夾夾閉胰膽管兩端 5 min后觀察胰腺水腫、出血及壞死情況[6]。逐層關腹，消毒。SO組大鼠開腹后僅翻動十二指腸及胰腺后關腹。PBA組在SAP造模前 3 d經腹腔注射PBA生理鹽水溶液（50 mg/kg大鼠體質量）[7]，SAP組及SO組在造模前 3 d經腹腔注射等體積的生理鹽水。
1.2.2 標本采集 造模術后12 h再次麻醉大鼠，開腹后經下腔靜脈采血 3 mL，離心后分離血清（4 000×g、離心半徑10 cm、離心時間10 min鴐，分裝后–20 ℃保存備檢。取大鼠胰頭及肝右葉組織，經4%多聚甲醛固定，常規石蠟包埋。
1.3 檢測指標及方法
1.3.1 血清酶學指標檢測 應用全自動多功能生化分析儀檢測大鼠血清淀粉酶（amylase，AMY鴐、谷丙轉氨酶（alanine aminotransferase，ALT）及谷草轉氨酶（aspartate transaminase，AST）的水平。
1.3.2 大鼠胰腺及肝臟組織病理學觀察 石蠟切片脫蠟后，梯度乙醇水化，經蘇木精-伊紅（HE）染色，再梯度脫水并中性樹膠封片固定。在光鏡下觀察胰腺及肝臟的病理學改變，每張切片隨機選取 6 個高倍視野（×200鴐，分別參照Schmidt等[8]與Camargo等[9]的方法進行胰腺組織的病理學評分和肝臟組織的病理學分級。
1.3.3 肝臟組織中GRP78、CHOP及Caspase-3蛋白表達檢測 采用參考文獻[10]的方法。選取具有代表性的12 h肝臟組織切片，脫蠟后梯度水化，高溫抗原修復后冷卻至室溫，3%過氧化氫滅活內源性過氧化氫酶，一抗（GRP78、CHOP、Caspase-3）孵育后4 ℃過夜，二抗孵育后經DAB顯色，蘇木精染色，鹽酸乙醇分化后依次脫水，中性樹膠封片固定。以高倍視野下細胞質/細胞核棕黃色顆粒為陽性表達。采用Image-pro plus 6.0專業圖像分析軟件進行分析，測定陽性染色部位的累積光密度值（integratedoptical density，IOD）作為結果進行統計學分析。
1.4 統計學方法
應用SPSS 22.0統計軟件進行分析。計量數據以均數±標準差（ ±s）表示，各組間差異采用單因素方差分析ANOVA檢驗，肝臟病理學分級采用Kruskall-Wallis非參數檢驗。檢驗水準α=0.05。
2 結果
2.1 大鼠血清酶學水平
與SO組比較，SAP組大鼠血清AMY水平顯著升高（P＜0.05鴐，PBA組AMY水平較SAP組略有降低，但差異無統計學意義（P＞0.05鴐。SAP組大鼠血清ALT及AST水平高于SO組（P＜0.05鴐，PBA組ALT及AST水平水平則較SAP組降低（P＜0.05鴐，但ALT仍高于SO組（P＜0.05鴐。見圖 1。
圖1
示各組大鼠血清AMY（a）、ALT（b）及AST（c）檢測結果 與SO組比較，*P<0.05；與SAP組比較，#P<0.05
2.2 大鼠胰腺組織病理學改變與評分
SO組大鼠胰腺光鏡下未見明顯異常改變。SAP組光鏡下可見胰腺結構明顯破壞，可見大量凝固樣壞死，殘存腺泡明顯水腫，伴有出血、炎性細胞浸潤等改變，胰腺病理學評分高于SO組（P＜0.05鴐。PBA組胰腺腺泡壞死范圍明顯減少，水腫、出血及炎性浸潤明顯減輕，胰腺病理學評分較SAP組降低（P＜0.05鴐，但仍高于SO組（P＜0.05鴐。見圖 2 及圖 3。
圖2
示各組大鼠胰腺組織病理學改變（HE ×200） a：SO組；b：SAP組；c：PBA組
圖3
各組大鼠胰腺組織病理評分結果 與SO組比較，*P＜0.05；與SAP組比較，#P＜0.05
2.3 大鼠肝臟組織病理學改變與分級
SO組大鼠肝臟光鏡下未見明顯異常改變。SAP組肝臟光鏡下可見血竇擴張、瘀血，肝細胞排列紊亂、水腫、空泡形成及炎性浸潤，部分出現肝點狀壞死等改變，其肝臟組織病理學分級高于SO組（P＜0.05鴐。PBA組肝臟部分細胞水腫、空泡變性、瘀血及炎性浸潤明顯減輕，肝臟組織病理學分級較SAP組降低（P＜0.05鴐，但仍高于SO組（P＜0.05鴐。見表 1 和圖 4。
表1
各組大鼠肝臟組織病理學分級
圖4
各組大鼠肝臟組織病理學改變（HE ×200） a：SO組；b：SAP組；c：PBA組
2.4 肝臟組織中GRP78、CHOP及Caspase-3蛋白表達檢測結果
GRP78蛋白在肝臟組織中的陽性表達為細胞質被染成棕黃色。SO組大鼠肝細胞中GRP78蛋白在細胞質中少量表達；SAP組大鼠肝細胞質中GRP78蛋白大量表達，可見大片黃染；PBA組大鼠肝細胞質中GRP78蛋白表達較SAP組明顯減少。與SO組比較，SAP組GRP78蛋白表達的IOD增高，差異有統計學意義（P＜0.05鴐；PBA組GRP78蛋白表達的IOD較SAP組降低，差異有統計學意義（P＜0.05鴐，但仍高于SO組（P＜0.05鴐。見圖 5 及圖 6。
圖5
示各組大鼠肝臟組織GRP78蛋白表達檢測結果（免疫組化染色 ×200） a：SO組；b：SAP組；c：PBA組
圖6
示各組大鼠肝臟組織GRP78蛋白表達的比較 與SO組比較，*P＜0.05；與SAP組比較，#P＜0.05
CHOP及Caspase-3蛋白在肝臟組織中的陽性表達為細胞質或細胞核被染成棕黃色。SO組大鼠肝細胞中CHOP及Caspase-3蛋白在細胞質及細胞核內有少許表達；SAP組大鼠肝細胞CHOP及Caspase-3蛋白廣泛表達于細胞質及細胞核內；PBA組大鼠肝細胞質及細胞核內可見少量CHOP及Caspase-3蛋白的表達。與SO組比較，SAP組CHOP及Caspase-3蛋白表達的IOD增高，差異有統計學意義鲙P＜0.05鴐；PBA組CHOP及Caspase-3蛋白表達的IOD較SAP組降低，差異有統計學意義（P＜0.05鴐。見圖 7～圖10。
圖7
示各組大鼠肝臟組織CHOP蛋白表達檢測結果（免疫組化染色 ×400） a：SO組；b：SAP組；c：PBA組
圖8
示大鼠肝臟組織CHOP蛋白表達的比較 與SO組比較，*P＜0.05；與SAP組比較，#P＜0.05
圖9
示各組大鼠肝組織Caspase-3蛋白表達檢測結果（免疫組化染色 ×400） a：SO組；b：SAP組；c：PBA組
圖10
示大鼠肝組織Caspase-3蛋白表達的比較 與SO組比較，*P＜0.05；與SAP組比較，#P＜0.05
3 討論
SAP發生后胰酶、促炎因子及壞死物質入血可直接或間接損傷肝臟，同時腸道血液循環和功能障礙，腸道菌群易位，內毒素入血，經門靜脈回流入肝，加重肝損傷[11-12]，進而導致肝臟對毒性物質及生物活性物質的解毒作用下降，這些物質進入體循環后成為全身組織和器官損傷加重的基礎，加重SAP病情，影響患者預后[13-14]。
在本實驗中，SAP造模后術后12 h，大鼠血清AMY與肝臟酶學指標ALT及AST明顯升高，胰腺及肝臟組織病理學改變顯示SAP大鼠胰腺及肝臟損傷嚴重，胰腺病理學評分與肝臟病理學分級顯著高于SO組，與筆者前期研究結果[15]一致，說明SAP組造模成功，且存在肝損傷。本研究通過對SAP大鼠腹腔注射PBA預處理，大鼠血清ALT及AST水平明顯降低，肝臟病理學分級得到改善，提示PBA可以減輕SAP大鼠的肝臟損傷。
ERS發生時，內質網膜上的GRP78蛋白表達明顯增加，與未折疊或錯誤折疊的蛋白結合，增強這些蛋白的折疊和降解，促進細胞內質網恢復穩態[16-17]。當ERS持續存在并且不能被克服時，內質網穩態超過自身調節能力，UPR可激活細胞內包括CHOP在內的促凋亡蛋白，進而誘導細胞凋亡[18-19]。ERS與多種疾病相關，被認為是乙醇性肝損傷、膽汁淤積性肝炎及乙肝所致急性肝衰竭等肝臟疾病的重要機制[20-22]。因此，人為干預ERS反應過程和強度，有可能減輕細胞損傷，改善疾病的進展[23]。已有研究[24]表明，GRP78與CHOP是內質網應激的重要標志蛋白。本研究結果也顯示，在SAP造模術后12 h，肝臟GRP78及CHOP蛋白表達明顯增加，提示SAP時肝組織發生了內質網應激。Caspase-3是Caspase級聯反應中下游的關鍵效應蛋白酶，在細胞凋亡過程中起了重要作用。本實驗中SAP組肝臟細胞Caspase-3蛋白表達比SO組明顯升高，這提示SAP可使肝臟Caspase-3蛋白表達上調，造成肝細胞凋亡增加。這與既往文獻[25]報道的基本一致。以上結果說明，SAP時可能通過ERS途徑誘導肝細胞凋亡，進而導致肝功能障礙。
PBA是一種化學性分子伴侶，可以穩定蛋白構象，改善內質網折疊能力，減少UPR，參與運輸突變蛋白，從而減輕ERS所致的損傷[26-27]。本研究PBA組肝臟GRP78、CHOP及Caspase-3蛋白表達均較SAP組明顯降低。提示PBA的干預可能是通過抑制GRP78及CHOP蛋白的表達，減輕了ERS反應過程和強度，進而減少了SAP所致的肝損傷。
本實驗通過建立大鼠SAP肝損傷模型，觀察到ERS參與了SAP大鼠肝損傷過程，而給予PBA干預可通過抑制ERS通路減輕肝細胞損傷和凋亡的程度。這為SAP相關肝損傷發生的治療提供了新的理論依據，但具體機制仍有待進一步研究。
重癥急性胰腺炎（severe acute pancreatitis，SAP）是急性胰腺炎的嚴重狀態，伴隨持續的其他器官損傷或功能衰竭。SAP并發肝損傷是常見的胰外臟器損傷之一，但其損傷機理尚未完全明了。肝細胞具有豐富的內質網，當受到有害因素刺激時，未折疊或錯誤折疊的蛋白質在內質網積聚，發生內質網應激（endoplasmic reticulum stress，ERS）[1]，進而激活未折疊蛋白反應（unfolded protein response，UPR鴐。已有研究表明，ERS在急性胰腺炎中發揮了重要作用[2]，并可能參與SAP肝損傷過程[3]。4-苯基丁酸（4-phenylbutyric acid，PBA）是一種小分子脂肪酸，已在臨床上用于治療尿素循環紊亂[4]；同時，它還具有調節ERS，減輕應激損傷的作用[5]。故本研究擬通過建立SAP大鼠模型，觀察PBA對SAP大鼠肝損傷的影響，并初步探討其作用機制。
1 材料與方法
1.1 實驗動物與試劑
成年雄性SPF級SD大鼠24只，購自湖南斯萊克景達實驗動物有限公司，體質量200～220 g，適應性喂養 2～3 d。使用隨機數字表法將實驗大鼠隨機分為假手術組（SO組鴐、SAP組及PBA干預組（PBA組鴐，每組 8 只。PBA和牛磺膽酸鈉（STC）購于Sigma公司，異氟烷購于雅培公司，大鼠葡萄糖調節蛋白78（glucose-regulated protein，GRP78鴐、CCAAT/增強子結合蛋白同源蛋白（CCAAT/ enhancer binding protein homologous protein，CHOP）及Caspase-3抗體均購自Abcam公司，EliVision super檢測試劑盒購自福建邁新生物技術開發有限公司。
1.2 動物模型制備及標本采集
1.2.1 動物模型制備 大鼠術前12 h禁食，自由飲水，稱重。異氟烷氣體麻醉后消毒鋪巾，沿腹正中線切口開腹，尋找十二指腸，暴露胰膽管，經十二指腸大乳頭開口處逆行胰膽管注射5%牛磺膽酸鈉（sodium taurocholate，STC）生理鹽水溶液（1 mL/kg大鼠體質量），以微型無損傷血管夾夾閉胰膽管兩端 5 min后觀察胰腺水腫、出血及壞死情況[6]。逐層關腹，消毒。SO組大鼠開腹后僅翻動十二指腸及胰腺后關腹。PBA組在SAP造模前 3 d經腹腔注射PBA生理鹽水溶液（50 mg/kg大鼠體質量）[7]，SAP組及SO組在造模前 3 d經腹腔注射等體積的生理鹽水。
1.2.2 標本采集 造模術后12 h再次麻醉大鼠，開腹后經下腔靜脈采血 3 mL，離心后分離血清（4 000×g、離心半徑10 cm、離心時間10 min鴐，分裝后–20 ℃保存備檢。取大鼠胰頭及肝右葉組織，經4%多聚甲醛固定，常規石蠟包埋。
1.3 檢測指標及方法
1.3.1 血清酶學指標檢測 應用全自動多功能生化分析儀檢測大鼠血清淀粉酶（amylase，AMY鴐、谷丙轉氨酶（alanine aminotransferase，ALT）及谷草轉氨酶（aspartate transaminase，AST）的水平。
1.3.2 大鼠胰腺及肝臟組織病理學觀察 石蠟切片脫蠟后，梯度乙醇水化，經蘇木精-伊紅（HE）染色，再梯度脫水并中性樹膠封片固定。在光鏡下觀察胰腺及肝臟的病理學改變，每張切片隨機選取 6 個高倍視野（×200鴐，分別參照Schmidt等[8]與Camargo等[9]的方法進行胰腺組織的病理學評分和肝臟組織的病理學分級。
1.3.3 肝臟組織中GRP78、CHOP及Caspase-3蛋白表達檢測 采用參考文獻[10]的方法。選取具有代表性的12 h肝臟組織切片，脫蠟后梯度水化，高溫抗原修復后冷卻至室溫，3%過氧化氫滅活內源性過氧化氫酶，一抗（GRP78、CHOP、Caspase-3）孵育后4 ℃過夜，二抗孵育后經DAB顯色，蘇木精染色，鹽酸乙醇分化后依次脫水，中性樹膠封片固定。以高倍視野下細胞質/細胞核棕黃色顆粒為陽性表達。采用Image-pro plus 6.0專業圖像分析軟件進行分析，測定陽性染色部位的累積光密度值（integratedoptical density，IOD）作為結果進行統計學分析。
1.4 統計學方法
應用SPSS 22.0統計軟件進行分析。計量數據以均數±標準差（ ±s）表示，各組間差異采用單因素方差分析ANOVA檢驗，肝臟病理學分級采用Kruskall-Wallis非參數檢驗。檢驗水準α=0.05。
2 結果
2.1 大鼠血清酶學水平
與SO組比較，SAP組大鼠血清AMY水平顯著升高（P＜0.05鴐，PBA組AMY水平較SAP組略有降低，但差異無統計學意義（P＞0.05鴐。SAP組大鼠血清ALT及AST水平高于SO組（P＜0.05鴐，PBA組ALT及AST水平水平則較SAP組降低（P＜0.05鴐，但ALT仍高于SO組（P＜0.05鴐。見圖 1。
圖1
示各組大鼠血清AMY（a）、ALT（b）及AST（c）檢測結果 與SO組比較，*P<0.05；與SAP組比較，#P<0.05
2.2 大鼠胰腺組織病理學改變與評分
SO組大鼠胰腺光鏡下未見明顯異常改變。SAP組光鏡下可見胰腺結構明顯破壞，可見大量凝固樣壞死，殘存腺泡明顯水腫，伴有出血、炎性細胞浸潤等改變，胰腺病理學評分高于SO組（P＜0.05鴐。PBA組胰腺腺泡壞死范圍明顯減少，水腫、出血及炎性浸潤明顯減輕，胰腺病理學評分較SAP組降低（P＜0.05鴐，但仍高于SO組（P＜0.05鴐。見圖 2 及圖 3。
圖2
示各組大鼠胰腺組織病理學改變（HE ×200） a：SO組；b：SAP組；c：PBA組
圖3
各組大鼠胰腺組織病理評分結果 與SO組比較，*P＜0.05；與SAP組比較，#P＜0.05
2.3 大鼠肝臟組織病理學改變與分級
SO組大鼠肝臟光鏡下未見明顯異常改變。SAP組肝臟光鏡下可見血竇擴張、瘀血，肝細胞排列紊亂、水腫、空泡形成及炎性浸潤，部分出現肝點狀壞死等改變，其肝臟組織病理學分級高于SO組（P＜0.05鴐。PBA組肝臟部分細胞水腫、空泡變性、瘀血及炎性浸潤明顯減輕，肝臟組織病理學分級較SAP組降低（P＜0.05鴐，但仍高于SO組（P＜0.05鴐。見表 1 和圖 4。
表1
各組大鼠肝臟組織病理學分級
圖4
各組大鼠肝臟組織病理學改變（HE ×200） a：SO組；b：SAP組；c：PBA組
2.4 肝臟組織中GRP78、CHOP及Caspase-3蛋白表達檢測結果
GRP78蛋白在肝臟組織中的陽性表達為細胞質被染成棕黃色。SO組大鼠肝細胞中GRP78蛋白在細胞質中少量表達；SAP組大鼠肝細胞質中GRP78蛋白大量表達，可見大片黃染；PBA組大鼠肝細胞質中GRP78蛋白表達較SAP組明顯減少。與SO組比較，SAP組GRP78蛋白表達的IOD增高，差異有統計學意義（P＜0.05鴐；PBA組GRP78蛋白表達的IOD較SAP組降低，差異有統計學意義（P＜0.05鴐，但仍高于SO組（P＜0.05鴐。見圖 5 及圖 6。
圖5
示各組大鼠肝臟組織GRP78蛋白表達檢測結果（免疫組化染色 ×200） a：SO組；b：SAP組；c：PBA組
圖6
示各組大鼠肝臟組織GRP78蛋白表達的比較 與SO組比較，*P＜0.05；與SAP組比較，#P＜0.05
CHOP及Caspase-3蛋白在肝臟組織中的陽性表達為細胞質或細胞核被染成棕黃色。SO組大鼠肝細胞中CHOP及Caspase-3蛋白在細胞質及細胞核內有少許表達；SAP組大鼠肝細胞CHOP及Caspase-3蛋白廣泛表達于細胞質及細胞核內；PBA組大鼠肝細胞質及細胞核內可見少量CHOP及Caspase-3蛋白的表達。與SO組比較，SAP組CHOP及Caspase-3蛋白表達的IOD增高，差異有統計學意義鲙P＜0.05鴐；PBA組CHOP及Caspase-3蛋白表達的IOD較SAP組降低，差異有統計學意義（P＜0.05鴐。見圖 7～圖10。
圖7
示各組大鼠肝臟組織CHOP蛋白表達檢測結果（免疫組化染色 ×400） a：SO組；b：SAP組；c：PBA組
圖8
示大鼠肝臟組織CHOP蛋白表達的比較 與SO組比較，*P＜0.05；與SAP組比較，#P＜0.05
圖9
示各組大鼠肝組織Caspase-3蛋白表達檢測結果（免疫組化染色 ×400） a：SO組；b：SAP組；c：PBA組
圖10
示大鼠肝組織Caspase-3蛋白表達的比較 與SO組比較，*P＜0.05；與SAP組比較，#P＜0.05
3 討論
SAP發生后胰酶、促炎因子及壞死物質入血可直接或間接損傷肝臟，同時腸道血液循環和功能障礙，腸道菌群易位，內毒素入血，經門靜脈回流入肝，加重肝損傷[11-12]，進而導致肝臟對毒性物質及生物活性物質的解毒作用下降，這些物質進入體循環后成為全身組織和器官損傷加重的基礎，加重SAP病情，影響患者預后[13-14]。
在本實驗中，SAP造模后術后12 h，大鼠血清AMY與肝臟酶學指標ALT及AST明顯升高，胰腺及肝臟組織病理學改變顯示SAP大鼠胰腺及肝臟損傷嚴重，胰腺病理學評分與肝臟病理學分級顯著高于SO組，與筆者前期研究結果[15]一致，說明SAP組造模成功，且存在肝損傷。本研究通過對SAP大鼠腹腔注射PBA預處理，大鼠血清ALT及AST水平明顯降低，肝臟病理學分級得到改善，提示PBA可以減輕SAP大鼠的肝臟損傷。
ERS發生時，內質網膜上的GRP78蛋白表達明顯增加，與未折疊或錯誤折疊的蛋白結合，增強這些蛋白的折疊和降解，促進細胞內質網恢復穩態[16-17]。當ERS持續存在并且不能被克服時，內質網穩態超過自身調節能力，UPR可激活細胞內包括CHOP在內的促凋亡蛋白，進而誘導細胞凋亡[18-19]。ERS與多種疾病相關，被認為是乙醇性肝損傷、膽汁淤積性肝炎及乙肝所致急性肝衰竭等肝臟疾病的重要機制[20-22]。因此，人為干預ERS反應過程和強度，有可能減輕細胞損傷，改善疾病的進展[23]。已有研究[24]表明，GRP78與CHOP是內質網應激的重要標志蛋白。本研究結果也顯示，在SAP造模術后12 h，肝臟GRP78及CHOP蛋白表達明顯增加，提示SAP時肝組織發生了內質網應激。Caspase-3是Caspase級聯反應中下游的關鍵效應蛋白酶，在細胞凋亡過程中起了重要作用。本實驗中SAP組肝臟細胞Caspase-3蛋白表達比SO組明顯升高，這提示SAP可使肝臟Caspase-3蛋白表達上調，造成肝細胞凋亡增加。這與既往文獻[25]報道的基本一致。以上結果說明，SAP時可能通過ERS途徑誘導肝細胞凋亡，進而導致肝功能障礙。
PBA是一種化學性分子伴侶，可以穩定蛋白構象，改善內質網折疊能力，減少UPR，參與運輸突變蛋白，從而減輕ERS所致的損傷[26-27]。本研究PBA組肝臟GRP78、CHOP及Caspase-3蛋白表達均較SAP組明顯降低。提示PBA的干預可能是通過抑制GRP78及CHOP蛋白的表達，減輕了ERS反應過程和強度，進而減少了SAP所致的肝損傷。
本實驗通過建立大鼠SAP肝損傷模型，觀察到ERS參與了SAP大鼠肝損傷過程，而給予PBA干預可通過抑制ERS通路減輕肝細胞損傷和凋亡的程度。這為SAP相關肝損傷發生的治療提供了新的理論依據，但具體機制仍有待進一步研究。
