• 解放軍總醫院第一附屬醫院燒傷整形科(北京,100048);
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目的 通過觀察嚴重燒傷患者血清對體外培養的人臍帶MSCs(human umbilical cord MSCs,hUCMSCs)生物學行為的影響,探討hUCMSCs移植治療嚴重燒傷的可行性。 方法 取足月剖腹產手術的健康胎兒臍帶組織分離培養hUCMSCs,將第3代hUCMSCs用于實驗。根據培養血清不同將實驗分為3組,分別為10%FBS組(A組)、10%正常血清組(B組)和10%燒傷血清組(C組)。于培養24 h、72 h和6 d,采用倒置顯微鏡觀察各組細胞形態及融合情況,MTT法測定細胞增殖;培養后第6天采用碘化丙啶染色、流式細胞儀檢測細胞周期,吖啶橙/溴化乙錠染色法檢測細胞凋亡,β-半乳糖苷酶(β-galactosidase,β-gal)染色檢測細胞衰老,ELISA法測定B、C組血清中TNF-α、IL-1、PDGF及IGF-1含量。 結果 各時間點各組細胞形態均呈長梭形,部分呈多角形;但C組細胞融合速度顯著快于A、B組。細胞增殖曲線顯示,培養2~6 d,C組增殖細胞數高于A、B組,差異有統計學意義(P  lt; 0.05)。流式細胞儀檢測示,培養6 d A、B、C組hUCMSCs增殖期(S期)比例分別為9.21% ± 1.02%、11.79% ± 1.87%和20.54% ± 2.03%,C組顯著高于A、B組(P  lt; 0.05)。各時間點各組細胞形態和結構正常,未見細胞核著橘紅色熒光的凋亡細胞或死亡細胞。培養6 d A、B、C組β-gal染色陽性細胞百分率分別為4.8% ± 0.2%、3.8% ± 0.4%和2.6% ± 0.1%,C組顯著低于A、B組(P  lt; 0.05)。ELISA法檢測C組血清中TNF-α、IL-1、PDGF及IGF-1含量顯著高于B組,差異有統計學意義(P  lt; 0.05)。 結論 嚴重燒傷患者血清中含有較高水平的TNF-α、IL-1、PDGF和IGF-1等細胞因子,可顯著刺激hUCMSCs快速增殖,不引起細胞凋亡,能減少細胞衰老,將hUCMSCs移植治療嚴重燒傷可行。

引用本文: 劉玲英,柴家科,侯玉森,段紅杰,郁永輝,尹會男,胡泉,樊軍,杜俊東. 嚴重燒傷患者血清對人臍帶MSCs生物學特性的影響. 中國修復重建外科雜志, 2013, 27(7): 769-774. doi: 10.7507/1002-1892.20130171 復制

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