RNA干擾環氧化酶-2抑制人表皮樣喉癌細胞系增殖和侵襲的研究_《華西醫學》

作者：

王曉俠 ^1,2 ,  姚小寶 ² , 張少強 ¹

1西安交通大學醫學院第一附屬醫院耳鼻喉科（西安，710061）;2解放軍451醫院耳鼻喉科;

關鍵詞：

喉癌環氧化酶-2基因慢病毒基因沉默

DOI：

10.7507/1002-0179.20130063

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目的　構建沉默環氧化酶-2（COX-2）基因重組慢病毒，觀察其體外侵襲的抑制作用，從而探討干擾COX-2抑制喉癌細胞增殖的作用機理，為喉癌的治療提供新的思路。方法　逆轉錄聚合酶鏈反應（RT-PCR）檢測COX-2基因在人表皮樣喉癌細胞（Hep-2）中的表達情況。利用上海吉凱公司RNA干擾（RNAi）慢病毒表達載體系統，構建針對COX-2基因慢病毒RNAi表達載體。轉染Hep-2細胞，干擾COX-2基因的表達，實時定量PCR檢測干擾前后基因表達變化。利用生長曲線測定干擾載體轉染前后細胞生長速度變化。流式細胞儀檢測細胞的生長周期。Boyden侵襲小室法測定體外侵襲力。結果　成功構建了COX-2慢病毒RNAi表達載體，并建立了干擾COX-2基因的Hep-2細胞系。實時定量PCR檢測COX-2基因在Hep-2細胞系中過表達被顯著抑制。生長曲線測定，COX-2基因干擾后細胞增殖明顯變慢。流式細胞儀檢測細胞的生長周期可見干擾組誘導Hep-2細胞凋亡，轉染G0～G1期細胞數量明顯上升，S期細胞減少，表明siRNA干擾Hep-2細胞后，細胞由G0～G1期進入到S期受到阻滯，細胞增殖速度下降。體外侵襲實驗中，Hep-2-AS侵襲細胞數（31.0 ± 1.8）顯著低于Hep-2細胞（104.0 ± 2.6）及Hep-2-P細胞（99.0 ± 2.7），差異有統計學意義（P＜0.05）。結論　喉癌中過表達的COX-2基因被干擾后表達明顯降低并顯著抑制細胞的生長速度和侵襲能力。同時驗證了COX-2基因RNA干擾在進行抗腫瘤的治療中潛在的應用前景。

引用本文： 王曉俠,姚小寶,張少強. RNA干擾環氧化酶-2抑制人表皮樣喉癌細胞系增殖和侵襲的研究. 華西醫學, 2013, 28(2): 195-199. doi: 10.7507/1002-0179.20130063 復制

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